小鼠多克隆抗体

小鼠（mouse）是啮齿目中体型较小的动物。新生小鼠1.5g左右，21天断乳时12-15g，1.5到2月龄体重达20g。成年雌小鼠体重18-35g，雄性体重在20-40g。小鼠性情温顺，容易捕捉，对外来刺激敏感，喜居住阴暗环境。
小鼠的品种和品系很多，是实验动物中培育品系最多的动物。目前世界上常用的近交品系小鼠约有250多个，均具有不同特征。突变品系小鼠约有350多个。野生毛色小鼠有C3H、CBA/N等；黑色小鼠有C57BL/6、C57BL/10、C58品系等；灰色小鼠有C57L、DBA/2品系等；白色小鼠有A、AKR、BALB/c、RF、SWR等品系。

在哺乳动物中，抗体包括5种重链α、δ、ε、γ和μ链，依据抗体重链的不同可以分为五个同种型：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。它们在恒定区的序列和数量、铰链结构和抗体结合价价数上都不同。抗体同种型转换机制，可以产生可变区相同，而恒定区不同的同种型抗体，从而具有相同的抗原特异性，不同的效应能力。同种型转换是不可逆的，通常B细胞最先表达IgM和IgD，之后表达IgG、IgE和IgA。
小鼠IgG不同的同种型在体内具有不同的半衰期，一般是12h到8天不等，表 1列出了小鼠抗体类别、子类、基因名称以及NCBI和IMGT基因数据库。
表1：小鼠抗体的类、亚类和基因名称

抗体有两条相同的重链（heavy，H）和两条相同的轻链（light，L）通过链间二硫键和非共价键链接而成的4条多肽链的单体糖蛋白分子，见图2。重链含有450-550个氨基酸，相对分子质量55-70KD，有α、δ、ε、γ和μ五种不同类型；轻链含有210个氨基酸，相对分子质量为24-25KD，有κ和λ两种类型（一个抗体只能含有κ或λ一种类型）。抗体可分为可变区（variable domain，V）和恒定区（constant domain，C）两部分。重链的N端1/4区域和轻链的N端1/2组成抗体的可变区（V区）。其中V区含有3个高变区（hyper-variable，HVR；又名互补决定区，complementarity determining region，CDR），每个高变区含有2-17个氨基酸，由于氨基酸的种类、排列和立体构象差异组成千万种抗体的微小区别区域，形成抗体的多样性结合不同抗原表位。CH1 CH2 CH3和CL是遗传标志所在处；IgG的CH2和IgM的CH3为补体结合部位；IgG的CH3是FcγR结合位点，FcγR有三种亚型：FcγRI、FcγRII、FcγRIII，其中IgE的CH4是FcεR的结合部位。其中抗体的ADCC作用:IgG2b>IgG2a>IgG1>>IgG3；C1q结合能力： IgG2a≥IgG2b>IgG3>IgG1。

图2 抗体结构和功能

抗原（antigen，Ag）是一类能够刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应答，并能与相应免疫物在体内外发生特异性反应的物质。完全抗原同时具有免疫原性和抗原性。自然界抗原物质种类繁多，按照来源分为天然抗原、人工抗原、合成抗原、基因工程抗原等，见表2。对于大多数动物，免疫系统非常敏感，用于免疫的抗原少至微克级别。
表2 常用免疫原

免疫小鼠获得多克隆抗体的优势：
（1）小鼠每次免疫抗原用量少至5-50ug。
（2）小鼠是可以采用静脉、皮下、皮内、肌肉和腹腔等多种免疫途径。
（3）小鼠繁殖速度快，体型小，所需周期短和饲养条件不高，各种品系经过几十年的验证，更加稳定，免疫反应明确。。
（4）小鼠品系稳定，抗体性质。
（5）加强免疫后，遇到抗原刺激，产生抗体的数量会更多，产生抗体的速度会更快。
小鼠多抗应用
小鼠多克隆抗体可以识别多个抗原表位，具有广泛的免疫学检测中应用场景：
斑点印迹法(Dot blot)
酶免疫测定(EIA, Enzyme Immunoassay)
电化学发光(Electrochem, Electrochemiluminescence)
酶联免疫吸附试验(ELISA, Enzyme-linked immunosorbent assay)
酶联免疫吸附斑点(ELISpot, Enzyme-linked immunosorbent spot)
免疫电镜(EM, Immuno-electron microscopy)
免疫细胞化学(ICC, Immunocytochemistry)
免疫荧光(IF, Immunofluorescence)
冰冻免疫荧光(IF-Fr, Immunofluorescence-frozen)
石蜡免疫荧光(IF-P, Immunofluorescence-paraffin)
免疫组织化学(IHC, Immunohistochemistry)
免疫沉淀(IP, Immunoprecipitation)
免疫印迹(WB, Western Blotting)
服务特色
（1）全面评估免疫原，为抗原设计提供专业的分析和建议。
（2）单个项目免疫动物数量灵活、根据要求设计实验
（3）多种免疫方案、佐剂，快速、高效提供抗体效价
（4）丰富的抗原选择与多途径免疫相结合
（5）从抗原设计、抗体制备、到抗体纯化、生物偶联等的一站式服务
 
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