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兔子

兔子多克隆抗体

简要描述:

兔子耳朵大,表面分布有清晰的血管。在抗原刺激后体液免疫应答反应强烈,广泛用于制备高效价的特异性免疫血清,兔子是产生多克隆抗体的主要动物宿主,因为它的体积小,繁殖周期快,与大多数研究模型有相当大的系统发育距离,而且抗体产生方案也很完善。可以产生高滴度、大量的抗血清,抗体亲和力可达到10-10到10-12M(pM级别)。制备多克隆抗体,用于人畜各类抗血清和诊断血清的研制。

详细介绍

兔子(Rabbit, Oryctolagus cuniculus)为草食性动物,性情温顺,胆小易惊,喜居安静、清洁、干燥、凉爽、空气新鲜的环境,耐冷不耐湿。中等体长,全身白色,耳根粗,耳厚而宽,耳短且直立,眼红色,臀肥圆,腰和肋部丰满。8-9周龄可达1.8千克,成年体重4-5千克,见图1。

兔子耳朵大,表面分布有清晰的血管。在抗原刺激后体液免疫应答反应强烈,广泛用于制备高效价的特异性免疫血清,兔子是产生多克隆抗体的主要动物宿主,因为它的体积小,繁殖周期快,与大多数研究模型有相当大的系统发育距离,而且抗体产生方案也很完善。可以产生高滴度、大量的抗血清,抗体亲和力可达到10-10到10-12M(pM级别)。制备多克隆抗体,用于人畜各类抗血清和诊断血清的研制。

实验用兔子
实验用白兔

目前在兔子中鉴定出四种同种型IgA、IgE、IgG和IgM。其中兔子的IgA有13个亚类。兔抗体类别、子类、基因名称以及 NCBI 和 IMGT 基因数据库见表 1。
兔子抗体亚型及基因型

IsotypesSubclassesNCBI accession numberIMGT gene
IgAIgA1X51647.1IGHA
IgA2X82108.1
IgA3X82109.1
IgA4X82110.1
IgA5X82111.1
IgA6X82112.1
IgA7X82113.1
IgA8X82114.1
IgA9X82115.1
IgA10X82116.1
IgA11X82117.1
IgA12X82118.1
IgA13X82119.1
IgE
AY386696IGHE
IgGIgGK1K01360.1 (90%)IGHG
IgGK2None (10%)
IgGλXM_051841878.1 (<1%)
IgM
J00666IGHM

兔子有两种同型形式的免疫球蛋白 kappa 轻链,K1 和 K2。在正常兔子中,只产生少量的 K2 轻链。同时,K2 含量在同种异型抑制的兔子和 K1 mRNA 剪接位点突变而不产生 K1的兔子品系中升高。其中常用的新西兰白兔有约90%的IgG-κ(K1)、约10%的IgG-κ(K2)和<1%的IgG-λ抗体,见图2。

天然兔抗体IgG结构示意图
天然兔抗体IgG结构示意图

蛋白质、多肽、碳水化合物、核酸、脂质和许多其他天然或合成的化合物都可以作为免疫原,见表2。抗原要激发初始免疫反应和强烈的二级免疫反应,含有能与原始B细胞的抗体结合表位。
常用免疫原

分类抗原种类优势
小分子目标分子与BSA、OVA等载体蛋白偶联偶联制备方案多样
多肽预测免疫优势表位,多肽合成及KLH偶联性价比高,制备便捷
磷酸化、乙酰化、甲基化等多肽合成及偶联位点特异性准确,设计合成方便
重组蛋白大肠杆菌表达、昆虫杆状系统、哺乳动物细胞、天然提取表达体系成熟,应用范围广泛,可以大规模生产
天然蛋白裂解物、纯化蛋白保留天然抗原结构表位,抗原丰度高
核酸目标基因载体构建与质粒大提价格便宜,制备方便,目标蛋白体内表达,折叠正确,糖基化与转录后修饰完备


兔子饲养方便,实验操作方便,是最常用的生产多克隆血清的动物。可以多次采血,容易免疫,制备抗体,易于纯化。是市售抗体最主要的来源之一。兔多抗具有多方面的优势:
(1)性价比高。
(2)生产速度快,可以在2个月交付抗体。
(3)易于存放,-20摄氏度可以保存5-10年。
(4)高度稳定,可耐受pH值或缓冲液变化。
(5)可以识别多个抗原表位,抗体对抗原的总体亲和力更高。
(6)多个表位的结合能提供更稳健的检测。
(7)能够检测样品中少量的蛋白质,具有更高的灵敏度。
(8)特别是在夹心ELISA中的捕获抗体,更高效的捕获目标蛋白,特别是在生物大分子检测方法开发中具有重要应用。
(9)超高的抗体亲和力会更快地与目标抗原结合。
(10)在分析在单个表位上细微变化(例如变性、多态性或构象变化)的蛋白质时,分析结果更加稳健。
(11)适合用于测定然蛋白分子。

兔多抗应用
兔多克隆抗体可以识别多个抗原表位,具有广泛的免疫学检测中应用场景:
染色质免疫沉淀(ChIP, Chromatin immunoprecipitation)
化学发光免疫分析(CLIA, Chemiluminescence immunoassay)
交联免疫沉淀(CLIP, Cross-linking immunoprecipitation)
竞争免疫分析(Competition Assay)
斑点印迹法(Dot blot)
酶免疫测定(EIA, Enzyme Immunoassay)
电化学发光(Electrochem, Electrochemiluminescence)
酶联免疫吸附试验(ELISA, Enzyme-linked immunosorbent assay)
竞争ELSIA(ELISA Comp, ELISA Competitive)
酶联免疫吸附斑点(ELISpot, Enzyme-linked immunosorbent spot)
免疫电镜(EM, Immuno-electron microscopy)
流式细胞术/细胞分选(FC/FACS, Flow cytometry/Cell sorting)
荧光免疫吸附试验(FLISA, Fluorophore-linked Immunosorbent Assay)
免疫亲和质谱(I-mass spec, Immunoaffinity-mass spec)
免疫细胞化学(ICC, Immunocytochemistry)
免疫细胞化学-免疫荧光(ICC-IF, Immunocytochemistry-immunoflourescence)
免疫电泳(IEP, Immunoelectrophoresis)
免疫荧光(IF, Immunofluorescence)
冰冻免疫荧光(IF-Fr, Immunofluorescence-frozen)
石蜡免疫荧光(IF-P, Immunofluorescence-paraffin)
全标本免疫荧光(IF-WM, Immunofluorescence-wholemount)
免疫组织化学(IHC, Immunohistochemistry)
免疫组织化学-冰冻免疫荧光(IHC-Fr-IF, Immunohistochemistry-frozen immunofluorescence)
免疫组织化学-免疫荧光(IHC-IF, Immunohistochemistry-immunofluorescence)
免疫组织荧光(IHF, Immunohistofluorescence)
免疫沉淀(IP, Immunoprecipitation)
甲基化DNA免疫沉淀(MeDIP, Methylated DNA immunoprecipitation)
放射性免疫测定(Radio, Radioactive-immunoassays)
RNA免疫沉淀(RNA-IP, RNA Immunoprecipitation)
单细胞WB(SCW, Single-Cell Western)
免疫印迹(WB, Western Blotting)
免疫沉淀物WB(WB post IP, Western blotting following immunoprecipitation)

服务特色
(1)免费分析抗原序列,利用专业的抗原设计软件设计抗原,结合文献,综合选择免疫原序列;
(2)丰富的多克隆抗体开发经验
(3)高亲和力和特异性
(4)利用自主研发佐剂,保证抗原和佐剂充分混匀,多点皮下注射,最大程度上提高免疫原效价;
(5)丰富的抗原选择与多途径免疫方法
(6)从抗原设计、抗体制备、抗体配对到抗体纯化的一步服务
(7)保证阳性免疫印迹结果和高ELISA滴度


 


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