膜蛋白是最大的、最重要的蛋白质类别之一。膜蛋白在各种生物过程中发挥着至关重要的作用,可以作为离子通道、转运蛋白、受体等发挥作用。相当一部分膜蛋白,尤其是转运蛋白和受体,被认为是药物的靶点。迄今为止,超过60%的FDA批准的抗体疗法以膜蛋白为靶点,这引起了制药行业的广泛关注。尽管膜蛋白在工业和学术研究中都发挥着重要作用,但它们的分离和表征却极具挑战性,这不仅是因为它们不溶性,还因为它们经常折叠成构象复杂的结构,难以在细胞外保留。
Profacgen 提供了一种高灵敏度、高通量的方法,用于筛选针对膜蛋白的候选药物。具体来说,该方法使用在人体细胞中单独表达的全长膜蛋白作为待测特定分子的“诱饵”。随后通过流式细胞术确认膜蛋白与其靶标的结合(图 1)。由于结合事件是在未固定的细胞中进行的,此时膜蛋白的结构保持完整,因此后续结果可以反映天然状态细胞中的蛋白质-靶标结合情况。
图 1. 流式细胞仪特性。(a)检测直径 56 µm 的毛细管中的 10 µm 荧光颗粒。光电倍增管 (PM) 信号为(顶部)以 25 µl/min 流速流动的未聚焦颗粒和(底部)以 100 µl/min 流速流动的聚焦颗粒;(b)检测绿色和红色 10 µm 标记颗粒混合物的散射和荧光。绿色、红色和蓝色轨迹分别代表以 508 nm 为中心的绿色荧光、以 658 nm 为中心的红色荧光和以 450 nm 为中心的散射。在 2 分钟内共检测到 8003 个绿色荧光颗粒和 2210 个红色荧光颗粒,而散射事件为 10113 个; (c)在流速为 400、600 和 800 µl/min 以及三种不同浓度的情况下,用纤维微流式细胞仪 (FMC) 和库尔特计数器测得的粒子数量比较。15 µm 粒子聚焦在 90 µm 毛细管中。
我们拥有一支分子生物学、蛋白质组学和生物化学领域的专家团队。我们致力于膜蛋白的表达,采用包括哺乳动物细胞、大肠杆菌、杆状病毒等在内的全系列表达系统。凭借我们成熟的平台,我们构建了一个包含超过4000个独特人类膜蛋白的大型膜蛋白库。此外,我们先进的流式细胞术系统为细胞的检测、物理测量和生化特性分析提供了强大的支持。
我们的膜蛋白结合分析技术能够精确检测膜蛋白与各种生物分子(包括小分子、肽、抗体、蛋白质和其他配体)的结合。此外,流式细胞术检测具有高灵敏度和卓越的高通量能力。值得一提的是,我们提供从样品到结果的一站式服务。客户只需将目标配体发送给我们,我们将协助识别相互作用以及最佳结合条件(时间、温度、pH 等)。
迈博睿生物为全球客户提供可靠、快速、专业的膜蛋白结合平台。凭借我们不断扩展的膜蛋白细胞库、世界一流的实验室设施以及经验丰富、敬业的科学家团队,迈博睿生物承诺与客户紧密合作,提供基于独特生物学见解的卓越服务。
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