背景
介绍
蛋白质相互作用分析仍然是功能基因组学的基石,其中基于细胞核的酵母双杂交 (Y2H) 系统是检测直接分子相互作用的关键工具。该方法源于 Stanley Fields 和 Ok-Kyu Song 在 20 世纪 90 年代初的开创性工作,现已发展成为一个高通量筛选平台,能够在天然核条件下系统地绘制相互作用组图。通过将诱饵-猎物融合构建体与可选择的报告基因相结合,该系统能够高效地识别结合伴侣,同时最大限度地减少细胞质干扰,使其成为揭示信号网络和发现药物靶点不可或缺的工具。
准备好精准探索蛋白质网络了吗?与迈博睿生物合作,利用我们在高通量酵母双杂交筛选和先进功能基因组学方面的专业知识。
为什么选择基于细胞核的酵母双杂交筛选?
该方法兼具经济高效的筛选和高灵敏度,可在真核生物天然核环境中检测微弱/瞬时蛋白质相互作用。可定制的检测方法(例如启动子-报告基因系统、PTM 兼容菌株)确保其适用于多种靶标,而核定位则保留了生理相关的相互作用,包括翻译后修饰的蛋白质。该方法非常适合定位信号转导中枢或药物靶标,将生化相关性与体外方法无法比拟的可扩展性相结合。
图1. 利用GAL4系统在酵母双杂交实验中检测蛋白质相互作用
跨行业应用
类型 | 描述 |
生物医学研究 |
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农业科学 |
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工业生物技术 |
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服务流程
样品提交要求
我们期待通过基于细胞核的酵母双杂交筛选服务,协助您探索蛋白质相互作用!为了确保您的项目顺利启动,请提供以下信息和样本:
- 目标蛋白信息
请提供您的目标蛋白的基因序列,包括 cDNA 序列。如果您有任何背景信息或具体要求,请告知我们。这将使我们能够定制服务,更好地满足您的需求。 - 诱饵载体(可选)
如果您已经构建了诱饵载体,请将其发送给我们。如果没有,不用担心,我们可以帮您构建!只需提供引物设计所需的基因片段信息即可。 - cDNA文库选择
我们提供多种标准化 cDNA 文库供您选择。如果您有定制文库,请告知我们——我们很乐意为您提供服务! - 样本质量:
对于 DNA 样本,请确保其纯度高,浓度≥50 ng/µL。如果提交蛋白质样本,请确保其活性高且纯度高。如有任何疑问,请随时联系我们,我们将竭诚为您服务! - 附加详细信息
有关您的目标蛋白质的任何额外信息,例如已知的相互作用或特定的筛选条件,都将对我们优化流程非常有帮助。
送货
- 详细筛选报告
- 阳性克隆序列和 BLAST 结果
- 高通量测序分析
- 可选验证数据(Co-IP、Pull-down)
- 标准时间:8-10周
- 加急时间:6-8周
服务范围
诱饵载体构建 我们提供全方位的诱饵载体构建支持,包括引物设计、基因扩增和克隆验证。我们的团队确保您的诱饵载体已充分准备好,可用于筛选过程。 |
文库筛选: 我们的高通量筛选流程利用标准化 cDNA 文库或您提供的定制文库。这种方法有助于我们高效地识别潜在的蛋白质相互作用。 |
自激活测试: 我们对诱饵载体进行自激活测试,以确认其不能独立激活报告基因。此步骤对于确保筛选结果的准确性和可靠性至关重要。 |
阳性克隆鉴定 我们通过PCR、测序和BLAST比对鉴定阳性克隆。我们将提供相互作用蛋白的详细信息,以帮助您解读结果。 |
反向变换和验证 我们进行反向变换和验证实验,以验证已识别相互作用的可靠性。这确保检测到的相互作用是真实的且可重复的。 |
定制解决方案 我们深知每个研究项目都有其独特的需求。因此,我们根据您的具体需求提供定制服务,包括针对特殊蛋白质筛选的优化和全面的技术支持。 |
为什么选择 迈博睿生物?
高质量筛查,低假阳性率
迈博睿生物利用先进的酵母菌株和多种报告基因来最大限度地减少假阳性,确保所识别的相互作用高度可靠且与您的研究相关。
满足您研究需求的定制解决方案
我们深知每个项目都是独一无二的。Profacgen 提供完全定制的服务,从诱饵载体构建到专业的 cDNA 文库筛选,均可满足您特定的实验需求。
整个项目期间的专家技术支持
我们的专家团队致力于为您提供全程支持。我们提供实验设计、故障排除和数据解读方面的咨询服务,确保您的项目成功。
种类繁多的即用型库
我们提供涵盖各种物种和组织的标准化 cDNA 文库。如果您有定制文库,我们也可以灵活地满足您的需求。
致力于研究成功
在迈博睿生物,我们致力于帮助您实现研究目标。我们致力于追求卓越和客户满意度,确保您获得最优质的服务和支持。