杂交瘤细胞体外培养法生产的抗体纯度高，可以避免鼠类病毒污染，简化质检项目，具有可控制性，适用于大规模工业生产，是单抗生产方式的重要发展方向。
体外培养杂交瘤细胞生产鼠源单克隆抗体工艺：
1.选择合适的杂交瘤细胞系
体外培养过程中出现杂交瘤细胞系低分泌或不稳定分泌现象，对用于体外培养的杂交瘤细胞特别注意：
（1）制备种子细胞时筛选必须彻底，阳性率必须达到95%以上；
（2）在保存细胞时, 应该经常复苏细胞(通常每年1次)，鉴定其阳性率，若阳性率下降必须重新筛选；
（3）由于杂交瘤细胞具有异质性,在细胞传代过程中，会发生染色体丢失、染色体片段缺失或其他遗传变异，使细胞失去或降低抗体分泌能力；
2.杂交瘤细胞体外培养条件的优化
杂交瘤细胞不是一个完整的生物个体, 在体内与周围环境构成整体，对环境的依赖性大。提高体外培养时杂交瘤细胞的抗体分泌水平, 需要尽可能模拟其在体内的生存环境。
（1）选择合适的培养基：使用DMEM、F 12、PRM 1640添加10 %-20 % 的胎牛血清或新生牛血清。在使用前还需加人一定浓度谷氨酞胺、葡萄糖、抗生素和碳酸氢钠等；
（2）杂交瘤细胞的代谢调控：碳代谢对谷氨酸胺非常敏感；
（3）杂交瘤细胞的凋亡：营养成分、生长因子的缺乏以及代谢产物的毒害作用均能导致凋亡；
（4）杂交瘤细胞的抗体基因表达调控：如果培养基中缺少某些活化这些反式因子的环境因子, 则抗体有可能不表达或低表达；
3.选用合适的培养模式和生物反应器
杂交瘤细胞是一种半悬浮（半贴壁）细胞, 在大规模体外培养中多可以参考悬浮培养，但杂交瘤细胞也具有哺乳动物细胞的特点, 细胞体积较大, 无细胞壁, 生长速度相对较慢, 细胞密度低, 在杂交瘤细胞体外培养中应对所用生物反应器及培养模式优化选择。T-75方瓶或转瓶培养，产量较低，单抗一般为10-100ug/ml，在搅拌式发酵罐批式培养中, 一般可达到100-300mg/L，微载体悬浮培养模式，一般可以达到2-3mg/ml。
4.建立成熟的下游产品纯化工艺
杂交瘤细胞培养上清中杂质较少，易纯化。 但血清含有的各种蛋白成分（如牛血清IgG、牛血清白蛋白、转铁蛋白等）不利于纯化。 无血清培养可以简化抗体纯化工艺。杂交瘤细胞清抗体的纯化一般包括：
(1)盐析沉淀
(2)澄清
(3)除盐及交换缓冲液
(4)层析纯化
